为了破坏verZ，分别用引物verZLB-F/verZRB-R和verZRB-F/verZRB-R从C.rogersoniana的基因组DNA中扩增出与verZ上游和下游相对应的2.0和2.1 kb DNA片段。将扩增的DNA片段插入pEASY-Blunt中，分别产生pEASY-verZL和pEASY-verZR。经测序验证后，用KpnI/XhoI消化pEASY-verZL，将含有verZ上游的消化DNA片段连接到pAgHG418的相应位点，得到pAgHG418-verZL。同时，用AscI/PacI消化pEASY-verZR，将含有verZ下游的消化DNA片段连接到pAgHG418-verZL的相应反应位点。
参考文献：Ellen M. Fox, Donald M. Gardiner, Nancy P. Keller, Barbara J. Howlett,A Zn(II)2Cys6 DNA binding protein regulates the sirodesmin PL biosynthetic gene cluster in Leptosphaeria maculans,Fungal Genetics and Biology,Volume 45, Issue 5,2008,Pages 671-682,ISSN 1087-1845
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为了破坏verZ，分别用引物verZLB-F/verZRB-R和verZRB-F/verZRB-R从C.rogersoniana的基因组DNA中扩增出与verZ上游和下游相对应的2.0和2.1 kb DNA片段。将扩增的DNA片段插入pEASY-Blunt中，分别产生pEASY-verZL和pEASY-verZR。经测序验证后，用KpnI/XhoI消化pEASY-verZL，将含有verZ上游的消化DNA片段连接到pAgHG418的相应位点，得到pAgHG418-verZL。同时，用AscI/PacI消化pEASY-verZR，将含有verZ下游的消化DNA片段连接到pAgHG418-verZL的相应反应位点。
参考文献：Ellen M. Fox, Donald M. Gardiner, Nancy P. Keller, Barbara J. Howlett,A Zn(II)2Cys6 DNA binding protein regulates the sirodesmin PL biosynthetic gene cluster in Leptosphaeria maculans,Fungal Genetics and Biology,Volume 45, Issue 5,2008,Pages 671-682,ISSN 1087-1845
