由P4199启动子驱动的JE1zyn合成基因，通过SOE PCR与氯霉素抗性标记融合，并通过同源重组整合到PEL基因座，产生TKK0007。与大观霉素抗性标记融合的Te Cas9d盒被整合到AmyE基因座，产生TKK0016。通过SOE-PCR将pE194的Erm基因（包括其天然终止子）与fgE的上下游扇形区融合，进行fgE敲除。将Te SOE片段转化到TKK0007中，从1µg/mL ERM LB板中选择转化体，所得菌株为BT11018。
参考文献:Fehler AO, Kallehauge TB, Geissler AS, González-Tortuero E, Seemann SE, Gorodkin J, Vinther J. Flagella disruption in Bacillus subtilis increases amylase production yield. Microb Cell Fact. 2022 Jul 2;21(1):131.
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由P4199启动子驱动的JE1zyn合成基因，通过SOE PCR与氯霉素抗性标记融合，并通过同源重组整合到PEL基因座，产生TKK0007。与大观霉素抗性标记融合的Te Cas9d盒被整合到AmyE基因座，产生TKK0016。通过SOE-PCR将pE194的Erm基因（包括其天然终止子）与fgE的上下游扇形区融合，进行fgE敲除。将Te SOE片段转化到TKK0007中，从1µg/mL ERM LB板中选择转化体，所得菌株为BT11018。
参考文献:Fehler AO, Kallehauge TB, Geissler AS, González-Tortuero E, Seemann SE, Gorodkin J, Vinther J. Flagella disruption in Bacillus subtilis increases amylase production yield. Microb Cell Fact. 2022 Jul 2;21(1):131.
