以谷氨酰胺ATCC 13032分离的染色体DNA为PCR模板，用Pfu DNA聚合酶扩增目的基因的DNA片段。使用不可复制的整合载体pK18mobsacB进行位点特异性基因破坏，该载体允许靶基因的无标记缺失。构建了包含靶基因内部框内缺失的pK18mobSacB整合载体，将这些重组质粒通过电穿孔导入野生型谷氨酰胺菌株，构建了被基因破坏的突变株。
参考文献：Hwang GH, Cho JY. Enhancement of L-ornithine production by disruption of three genes encoding putative oxidoreductases in Corynebacterium glutamicum. J Ind Microbiol Biotechnol. 2014 Mar;41(3):573-8.
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以谷氨酰胺ATCC 13032分离的染色体DNA为PCR模板，用Pfu DNA聚合酶扩增目的基因的DNA片段。使用不可复制的整合载体pK18mobsacB进行位点特异性基因破坏，该载体允许靶基因的无标记缺失。构建了包含靶基因内部框内缺失的pK18mobSacB整合载体，将这些重组质粒通过电穿孔导入野生型谷氨酰胺菌株，构建了被基因破坏的突变株。
参考文献：Hwang GH, Cho JY. Enhancement of L-ornithine production by disruption of three genes encoding putative oxidoreductases in Corynebacterium glutamicum. J Ind Microbiol Biotechnol. 2014 Mar;41(3):573-8.
