1、取感受态细胞置于冰浴中，放置10分钟。

2、向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA，轻轻地敲打4-5下。

3、冰浴30分钟，不要震荡。

4、42热击45秒，不要震荡，迅速转移到冰浴中，放置2分钟。

5、加入250μl室温的SOC培养基。

6、混匀后，置于37的摇床上，250rpm震荡培养60min。

7、将含有抗生素的平板加热到37，放置半个小时，使其表面干燥，易于均匀涂布。

8、根据实验要求，取适量转化的感受态的细胞，加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上（LB或SOC），用无菌棒将细胞均匀涂开，将平板置于37培养箱，倒置过夜培养（8-12h）。