以酿酒酵母S288C基因组为模板，用引物对Ppgk基因和ARO10基因进行PCR扩增，将扩增的基因片段分别连接到pMD19-T Simple质粒中，用AgeⅠ和PvuⅡ对两种质粒进行酶切，然后经过T4 DNA Ligase于大肠杆菌感受态中连接，提取重组质粒，得到质粒pYES2-Ppgk,再用SacⅠ和XbaⅠ分别对pMD19-T-ARO10和pYES2-Ppgk进行酶切，然后进行连接，最后得到重组质粒pYES2-Ppgk-ARO10。
参考文献：[1]温明显,王成涛,杨雪莲,等.ARO10基因在Saccharomyces cerevisiae中的克隆表达及其对3-甲硫基丙醇合成代谢的影响[J].食品与发酵工业, 2012, 38(4):5.
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酿酒酵母过表达脱羧酶影响β-苯乙醇生产
以酿酒酵母S288C基因组为模板，用引物对Ppgk基因和ARO10基因进行PCR扩增，将扩增的基因片段分别连接到pMD19-T Simple质粒中，用AgeⅠ和PvuⅡ对两种质粒进行酶切，然后经过T4 DNA Ligase于大肠杆菌感受态中连接，提取重组质粒，得到质粒pYES2-Ppgk,再用SacⅠ和XbaⅠ分别对pMD19-T-ARO10和pYES2-Ppgk进行酶切，然后进行连接，最后得到重组质粒pYES2-Ppgk-ARO10。
参考文献：[1]温明显,王成涛,杨雪莲,等.ARO10基因在Saccharomyces cerevisiae中的克隆表达及其对3-甲硫基丙醇合成代谢的影响[J].食品与发酵工业, 2012, 38(4):5.
