用gpdA启动子取代了clrB启动子,使用ptrA基因作为转化株筛选的选择性标记,利用引物从质粒pAN7-1中扩增出gpdA启动子。用引物对2008 bp的ptra可选择性标记盒进行pcr扩增。用引物对clrB-Fa和clrB-Ra扩增出clrB编码区和终止子3148 bp,该片段与gpdA启动子和ptra片段末端分别重叠25 bp,利用巢式PCR与PtraR1将这些片段以gpdA(p)-clrB(编码区)-ptra顺序融合得到长6375 bp的PCR产物。

文献参考:Yao G, Li Z, Gao L, Wu R, Kan Q, Liu G, Qu Y. Redesigning the regulatory pathway to enhance cellulase production in Penicillium oxalicum. Biotechnol Biofuels. 2015 Apr 23;8:71.
用gpdA启动子取代了clrB启动子,使用ptrA基因作为转化株筛选的选择性标记,利用引物从质粒pAN7-1中扩增出gpdA启动子。用引物对2008 bp的ptra可选择性标记盒进行pcr扩增。用引物对clrB-Fa和clrB-Ra扩增出clrB编码区和终止子3148 bp,该片段与gpdA启动子和ptra片段末端分别重叠25 bp,利用巢式PCR与PtraR1将这些片段以gpdA(p)-clrB(编码区)-ptra顺序融合得到长6375 bp的PCR产物。

文献参考:Yao G, Li Z, Gao L, Wu R, Kan Q, Liu G, Qu Y. Redesigning the regulatory pathway to enhance cellulase production in Penicillium oxalicum. Biotechnol Biofuels. 2015 Apr 23;8:71.