利用pMW118-（λattL-Cm-λattR）质粒，通过PCR方法获得了fumB、fumAC、aceBAK和glcB基因失活的线性DNA片段，PCR产物分别整合到携带pKD46辅助质粒的大肠杆菌MG1655菌株的染色体上。将编码丙酮酸羧化酶的pycA基因整合到mg1655衍生的大肠杆菌的染色体中替换掉poxB基因并使其处于噬菌体强启动子，用P1介导转移到大肠杆菌中。
参考文献：Causey TB, Shanmugam KT, Yomano LP, Ingram LO. Engineering Escherichia coli for efficient conversion of glucose to pyruvate. Proc Natl Acad Sci U S A. 2004 Feb 24;101(8):2235-40.
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工程大肠杆菌葡萄糖转化为富马酸
利用pMW118-（λattL-Cm-λattR）质粒，通过PCR方法获得了fumB、fumAC、aceBAK和glcB基因失活的线性DNA片段，PCR产物分别整合到携带pKD46辅助质粒的大肠杆菌MG1655菌株的染色体上。将编码丙酮酸羧化酶的pycA基因整合到mg1655衍生的大肠杆菌的染色体中替换掉poxB基因并使其处于噬菌体强启动子，用P1介导转移到大肠杆菌中。
参考文献：Causey TB, Shanmugam KT, Yomano LP, Ingram LO. Engineering Escherichia coli for efficient conversion of glucose to pyruvate. Proc Natl Acad Sci U S A. 2004 Feb 24;101(8):2235-40.
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