构建了一个碱基编辑系统pnCasPA-BEC。在该质粒中，胞苷脱氨酶通过XTEN连接子融合到Cas9镍酶的N端。融合蛋白和sgRNA的表达分别由rpsL启动子和trc启动子驱动。将两个BsaI位点设计到质粒中，利用Golden Gate assembly无缝克隆了20-bp的间隔区。该系统引入宽宿主复制子mSF，用于假单胞菌的质粒复制，利用sacB基因在编辑后进行质粒固化。
参考文献：Chen W, Zhang Y, Zhang Y, Pi Y, Gu T, Song L, Wang Y, Ji Q. CRISPR/Cas9-based Genome Editing in Pseudomonas aeruginosa and Cytidine Deaminase-Mediated Base Editing in Pseudomonas Species. iScience. 2018 Aug 31;6:222-231.
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构建了一个碱基编辑系统pnCasPA-BEC。在该质粒中，胞苷脱氨酶通过XTEN连接子融合到Cas9镍酶的N端。融合蛋白和sgRNA的表达分别由rpsL启动子和trc启动子驱动。将两个BsaI位点设计到质粒中，利用Golden Gate assembly无缝克隆了20-bp的间隔区。该系统引入宽宿主复制子mSF，用于假单胞菌的质粒复制，利用sacB基因在编辑后进行质粒固化。
参考文献：Chen W, Zhang Y, Zhang Y, Pi Y, Gu T, Song L, Wang Y, Ji Q. CRISPR/Cas9-based Genome Editing in Pseudomonas aeruginosa and Cytidine Deaminase-Mediated Base Editing in Pseudomonas Species. iScience. 2018 Aug 31;6:222-231.
