分别用引物从白蚁LYT10的cDNA中扩增出mttA、cadA、ATEG_09969、gpdA、acoA和citA的DNA片段。从土曲霉LYT10基因组DNA中扩增出含有mfsA的DNA片段。黑曲霉Co827的cDNA中扩增出pfK1c端去除335个氨基酸的截断的pfkA，并利用引物mt-pfkA-F/mt-pfkAR对pfkA的磷酸化位点Thr 89进行突变。将所有DNA片段分别插入载体pAN52-4的NcoI和BamHI或HindIII的酶切位点，分别获得pAN52-XX（XX，不同基因）质粒。用DraI和EcoRI将质粒线性化，分别与pAN7-1共转化进入土曲霉LYT10。
参考文献：Huang X, Lu X, Li Y, Li X, Li JJ. Improving itaconic acid production through genetic engineering of an industrial Aspergillus terreus strain. Microb Cell Fact. 2014 Aug 11;13:119.
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分别用引物从白蚁LYT10的cDNA中扩增出mttA、cadA、ATEG_09969、gpdA、acoA和citA的DNA片段。从土曲霉LYT10基因组DNA中扩增出含有mfsA的DNA片段。黑曲霉Co827的cDNA中扩增出pfK1c端去除335个氨基酸的截断的pfkA，并利用引物mt-pfkA-F/mt-pfkAR对pfkA的磷酸化位点Thr 89进行突变。将所有DNA片段分别插入载体pAN52-4的NcoI和BamHI或HindIII的酶切位点，分别获得pAN52-XX（XX，不同基因）质粒。用DraI和EcoRI将质粒线性化，分别与pAN7-1共转化进入土曲霉LYT10。
参考文献：Huang X, Lu X, Li Y, Li X, Li JJ. Improving itaconic acid production through genetic engineering of an industrial Aspergillus terreus strain. Microb Cell Fact. 2014 Aug 11;13:119.
