从pACYC184中扩增出cat基因，从枯草芽孢杆菌中扩增出sacB基因，将PCR产物用 SacI酶切，然后用T4连接酶连接，然后和pEASY-Blunt连接得到pXZ-CS。galP和pck基因的表达由大肠杆菌pck启动子突变体控制，从大肠杆菌中扩增得到PCK启动子并将其克隆到pTrc99A得到pXZ602，对pXZ602进行扩增并自连接的大 pXZ603。
参考文献：Tan Z, Zhu X, Chen J, Li Q, Zhang X. Activating phosphoenolpyruvate carboxylase and phosphoenolpyruvate carboxykinase in combination for improvement of succinate production. Appl Environ Microbiol. 2013 Aug;79(16):4838-44.
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从pACYC184中扩增出cat基因，从枯草芽孢杆菌中扩增出sacB基因，将PCR产物用 SacI酶切，然后用T4连接酶连接，然后和pEASY-Blunt连接得到pXZ-CS。galP和pck基因的表达由大肠杆菌pck启动子突变体控制，从大肠杆菌中扩增得到PCK启动子并将其克隆到pTrc99A得到pXZ602，对pXZ602进行扩增并自连接的大 pXZ603。
参考文献：Tan Z, Zhu X, Chen J, Li Q, Zhang X. Activating phosphoenolpyruvate carboxylase and phosphoenolpyruvate carboxykinase in combination for improvement of succinate production. Appl Environ Microbiol. 2013 Aug;79(16):4838-44.
