通过PCR从W1485制备的基因组DNA中克隆大肠杆菌的天然ptsG基因，将该基因克隆到载体pFJ118EH（10）中，得到pJFptsG。通过将用EcoRI切下的pUC-4K（Pharmacia）的卡那霉素抗性盒插入pJFptsG中ptsG基因的MfeI位点来破坏该基因，从而得到质粒pPTSGK。
参考文献：Chatterjee R, Millard CS, Champion K, Clark DP, Donnelly MI. Mutation of the ptsG gene results in increased production of succinate in fermentation of glucose by Escherichia coli. Appl Environ Microbiol. 2001 Jan;67(1):148-54.
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通过PCR从W1485制备的基因组DNA中克隆大肠杆菌的天然ptsG基因，将该基因克隆到载体pFJ118EH（10）中，得到pJFptsG。通过将用EcoRI切下的pUC-4K（Pharmacia）的卡那霉素抗性盒插入pJFptsG中ptsG基因的MfeI位点来破坏该基因，从而得到质粒pPTSGK。
参考文献：Chatterjee R, Millard CS, Champion K, Clark DP, Donnelly MI. Mutation of the ptsG gene results in increased production of succinate in fermentation of glucose by Escherichia coli. Appl Environ Microbiol. 2001 Jan;67(1):148-54.
