厌氧培养基在大气中放置时间过长而被氧化（固体培养基被氧化后表面Eh上升，液体培养基因溶解氧过多不利于厌氧菌生长），对厌氧菌生长不利，故在进行厌氧菌培养时最好使用新配制的培养基，如使用陈旧培养基需进行预还原处理。
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