质粒pXMJ19ts-PnCas9通过等温组装克隆了4个DNA片段：温度敏感复制子片段pBLts、卡那霉素抗性基因（Knr）、大肠杆菌复制子pSC101和具有天然启动子的cas9。使用pXMJ19-PnCas9作为模板放大pSC101-pBLts-Knr片段，并分别组装片段包含各种核酸酶基因与给定的启动子（PlacM-cas9，PlacM-cas9D10A，PlacM-cpf1和PlacM-cpf1n）得到质粒质粒pXMJ19ts-Plcas9，pXMJ19ts-Plcas9n，pXMJ19ts-Plcpf1和pXXJ19ts-Plcpf1n。
参考文献：Jiang Y, Qian F, Yang J, Liu Y, Dong F, Xu C, Sun B, Chen B, Xu X, Li Y, Wang R, Yang S. CRISPR-Cpf1 assisted genome editing of Corynebacterium glutamicum. Nat Commun. 2017 May 4;8:15179.
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质粒pXMJ19ts-PnCas9通过等温组装克隆了4个DNA片段：温度敏感复制子片段pBLts、卡那霉素抗性基因（Knr）、大肠杆菌复制子pSC101和具有天然启动子的cas9。使用pXMJ19-PnCas9作为模板放大pSC101-pBLts-Knr片段，并分别组装片段包含各种核酸酶基因与给定的启动子（PlacM-cas9，PlacM-cas9D10A，PlacM-cpf1和PlacM-cpf1n）得到质粒质粒pXMJ19ts-Plcas9，pXMJ19ts-Plcas9n，pXMJ19ts-Plcpf1和pXXJ19ts-Plcpf1n。
参考文献：Jiang Y, Qian F, Yang J, Liu Y, Dong F, Xu C, Sun B, Chen B, Xu X, Li Y, Wang R, Yang S. CRISPR-Cpf1 assisted genome editing of Corynebacterium glutamicum. Nat Commun. 2017 May 4;8:15179.
