开发了一个基于热敏感转录抑制因子TlpA39的超声可激活整合基因电路介导的治疗活性工程细菌。将YopE1-15 III型分泌序列与高斯荧光素酶（Gluc）报告蛋白融合，以指导其细胞外分泌。构建了一个基于热敏转录阻遏物TlpA39和由合成启动子PTlpA驱动的报告基因LuxCDABE非侵入性控制的片段，该启动子包含TlpA39特异性DNA结合序列（OTlpA）。作为一种热敏卷曲螺旋蛋白，随着温度升高至39°C，TlpA39可以快速可逆地从同型二聚体形式解离为单体。当温度低于39°C时，TlpA39同型二聚体与合成嵌合启动子PTlpA结合并阻断LuxCDABE盒的转录。当温度升高到39℃时，TlpA39蛋白从PTlpA解离，从而使LuxCDABE转录。为了减少基础激活和提高诱导效率，使用LuxCDABE作为报告基因（SINGER LuxCDABE）构建并评估了多种配置，以优化VNP20009细胞的诱导谱。测试了六种具有不同翻译效率的RBS，三种具有不同OTlpA串联重复变体的合成启动子（PTlpA）和四种不同的组成型启动子来驱动TlpA39表达。
参考文献：Gao T, Niu L, Wu X, Dai D, Zhou Y, Liu M, Wu K, Yu Y, Guan N, Ye H. Sonogenetics-controlled synthetic designer cells for cancer therapy in tumor mouse models. Cell Rep Med. 2024 May 21;5(5):101513.
技术服务 Technology Services
联系我们
CONTACT US
-
0574-87917803
服务热线 -
testobio@163.com
邮箱
开发了一个基于热敏感转录抑制因子TlpA39的超声可激活整合基因电路介导的治疗活性工程细菌。将YopE1-15 III型分泌序列与高斯荧光素酶（Gluc）报告蛋白融合，以指导其细胞外分泌。构建了一个基于热敏转录阻遏物TlpA39和由合成启动子PTlpA驱动的报告基因LuxCDABE非侵入性控制的片段，该启动子包含TlpA39特异性DNA结合序列（OTlpA）。作为一种热敏卷曲螺旋蛋白，随着温度升高至39°C，TlpA39可以快速可逆地从同型二聚体形式解离为单体。当温度低于39°C时，TlpA39同型二聚体与合成嵌合启动子PTlpA结合并阻断LuxCDABE盒的转录。当温度升高到39℃时，TlpA39蛋白从PTlpA解离，从而使LuxCDABE转录。为了减少基础激活和提高诱导效率，使用LuxCDABE作为报告基因（SINGER LuxCDABE）构建并评估了多种配置，以优化VNP20009细胞的诱导谱。测试了六种具有不同翻译效率的RBS，三种具有不同OTlpA串联重复变体的合成启动子（PTlpA）和四种不同的组成型启动子来驱动TlpA39表达。
参考文献：Gao T, Niu L, Wu X, Dai D, Zhou Y, Liu M, Wu K, Yu Y, Guan N, Ye H. Sonogenetics-controlled synthetic designer cells for cancer therapy in tumor mouse models. Cell Rep Med. 2024 May 21;5(5):101513.
