用引物M3E5（M3S3）和M3S3)扩增MPS1 ORF，并亚克隆到酵母表达载体pYES2（Invitrogen）的EcoRI和SacI位点之间。然后将该结构体转化为酵母菌菌株DL456。MPS1上游1.4kb的HindIII片段末端充满DNA聚合酶I，并作为克隆到pBluescript II KS (1)的SmaI位点pM3L7。将pM3R24中2.4kb的XhoI-HindIII片段（MPS1下游）克隆到pM3L7上的XhoI-HindIII位点。将潮霉素磷酸化转移酶基因克隆到EcoRI位点，构建mps1-1D基因置换载体pM3H22。
参考文献：Xu JR, Staiger CJ, Hamer JE. Inactivation of the mitogen-activated protein kinase Mps1 from the rice blast fungus prevents penetration of host cells but allows activation of plant defense responses. Proc Natl Acad Sci U S A. 1998 Oct 13;95(21):12713-8.
技术服务 Technology Services
联系我们
CONTACT US
-
0574-87917803
服务热线 -
testobio@163.com
邮箱
用引物M3E5（M3S3）和M3S3)扩增MPS1 ORF，并亚克隆到酵母表达载体pYES2（Invitrogen）的EcoRI和SacI位点之间。然后将该结构体转化为酵母菌菌株DL456。MPS1上游1.4kb的HindIII片段末端充满DNA聚合酶I，并作为克隆到pBluescript II KS (1)的SmaI位点pM3L7。将pM3R24中2.4kb的XhoI-HindIII片段（MPS1下游）克隆到pM3L7上的XhoI-HindIII位点。将潮霉素磷酸化转移酶基因克隆到EcoRI位点，构建mps1-1D基因置换载体pM3H22。
参考文献：Xu JR, Staiger CJ, Hamer JE. Inactivation of the mitogen-activated protein kinase Mps1 from the rice blast fungus prevents penetration of host cells but allows activation of plant defense responses. Proc Natl Acad Sci U S A. 1998 Oct 13;95(21):12713-8.
