将具有SV40核定位信号的Cas9基因在里氏木霉中进行表达优化，为了高效表达toCas9，我们使用一个构成型启动子Ppdc和一个可诱导型启动子Pcbh1分别在Qm6a和Rut-C30中表达toCas9。将eGFP基因与toCas9融合作为一个标签。所有以Tpdc为终止子的盒融合到线性化pDHc的pDHt/sk的XbaI位点，生成pDHt/sk-Ppdc-toCas9-Tpdc, pDHt/sk-Ppdc-toCas9-eGFP-Tpdc, pDHt/sk-Pcbh1-toCas9-Tpdc,和pDHt/sk-Pcbh1-toCas9-eGFP-Tpdc。
参考文献：Liu R, Chen L, Jiang Y, Zhou Z, Zou G. Efficient genome editing in filamentous fungus Trichoderma reesei using the CRISPR/Cas9 system. Cell Discov. 2015 May 12;1:15007.
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将具有SV40核定位信号的Cas9基因在里氏木霉中进行表达优化，为了高效表达toCas9，我们使用一个构成型启动子Ppdc和一个可诱导型启动子Pcbh1分别在Qm6a和Rut-C30中表达toCas9。将eGFP基因与toCas9融合作为一个标签。所有以Tpdc为终止子的盒融合到线性化pDHc的pDHt/sk的XbaI位点，生成pDHt/sk-Ppdc-toCas9-Tpdc, pDHt/sk-Ppdc-toCas9-eGFP-Tpdc, pDHt/sk-Pcbh1-toCas9-Tpdc,和pDHt/sk-Pcbh1-toCas9-eGFP-Tpdc。
参考文献：Liu R, Chen L, Jiang Y, Zhou Z, Zou G. Efficient genome editing in filamentous fungus Trichoderma reesei using the CRISPR/Cas9 system. Cell Discov. 2015 May 12;1:15007.
