对基因进行密码子优化优化了源自甲醇芽孢杆菌MGA3的基因mdh、mdh3和act在谷氨酸杆菌中的表达。所有基因都是都用限制位点消化，亚克隆到谷氨酸梭菌表达载体中，在标准载体上以纯化DNA的形式提供。通过PCR从谷氨酸梭菌ATCC 13032的基因组DNA中扩增出adhA基因。通过PCR从枯草芽孢杆菌168的基因组DNA中扩增出基因yckG和yckF。对于在组成型启动子控制下的异源基因表达，首先通过PCR从谷氨酸棒杆菌的基因组DNA中扩增，随后在上述基因之前克隆。
参考文献：Witthoff S, Schmitz K, Niedenführ S, Nöh K, Noack S, Bott M, Marienhagen J. Metabolic engineering of Corynebacterium glutamicum for methanol metabolism. Appl Environ Microbiol. 2015 Mar;81(6):2215-25.
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对基因进行密码子优化优化了源自甲醇芽孢杆菌MGA3的基因mdh、mdh3和act在谷氨酸杆菌中的表达。所有基因都是都用限制位点消化，亚克隆到谷氨酸梭菌表达载体中，在标准载体上以纯化DNA的形式提供。通过PCR从谷氨酸梭菌ATCC 13032的基因组DNA中扩增出adhA基因。通过PCR从枯草芽孢杆菌168的基因组DNA中扩增出基因yckG和yckF。对于在组成型启动子控制下的异源基因表达，首先通过PCR从谷氨酸棒杆菌的基因组DNA中扩增，随后在上述基因之前克隆。
参考文献：Witthoff S, Schmitz K, Niedenführ S, Nöh K, Noack S, Bott M, Marienhagen J. Metabolic engineering of Corynebacterium glutamicum for methanol metabolism. Appl Environ Microbiol. 2015 Mar;81(6):2215-25.
