loxP::sC/NS4突变株由携带loxP-A.nidulans sC-loxP盒和niaD基因的pUGsCniaD质粒构建。使用QuikChange位点定向诱变试剂盒和引物将SphI位点引入pUG6，得到pUG6Sp。sC标记盒由用XbaI和SphI消化的pUSC制备。将消化的sC片段连接到pUG6Sp的XbaI和SphI位点，得到pUG6sC。接下来，从用AvrII和SpeI消化的pNGA142制备niaD标记盒。用SpeI消化pUG6sC质粒后去磷酸化，并与消化的niaD片段连接，得到pUGsCniaD。
参考文献：Mizutani O, Masaki K, Gomi K, Iefuji H. Modified Cre-loxP recombination in Aspergillus oryzae by direct introduction of Cre recombinase for marker gene rescue. Appl Environ Microbiol. 2012 Jun;78(12):4126-33.
技术服务 Technology Services
联系我们
CONTACT US
-
0574-87917803
服务热线 -
testobio@163.com
邮箱
loxP::sC/NS4突变株由携带loxP-A.nidulans sC-loxP盒和niaD基因的pUGsCniaD质粒构建。使用QuikChange位点定向诱变试剂盒和引物将SphI位点引入pUG6，得到pUG6Sp。sC标记盒由用XbaI和SphI消化的pUSC制备。将消化的sC片段连接到pUG6Sp的XbaI和SphI位点，得到pUG6sC。接下来，从用AvrII和SpeI消化的pNGA142制备niaD标记盒。用SpeI消化pUG6sC质粒后去磷酸化，并与消化的niaD片段连接，得到pUGsCniaD。
参考文献：Mizutani O, Masaki K, Gomi K, Iefuji H. Modified Cre-loxP recombination in Aspergillus oryzae by direct introduction of Cre recombinase for marker gene rescue. Appl Environ Microbiol. 2012 Jun;78(12):4126-33.
