以JM109基因组DNA为模板，使用正向引物speA-F和反向引物speA-R通过PCR生成speA的开放阅读框。正向引物speA-C在其5'末端有一个EcoRI位点，反向引物speA-5在其5'-末端有个HindIII位点。用EcoRI和HindIII消化speA片段，并将其连接到同样消化的pKK223-3中，产生重组表达载体pKK223-3-speA。将pKK223-3-speA转化到菌株AUX4中并将所得菌株命名为AUX5。通过SDS-PAGE和活性分析确定编码ADC的speA基因的表达。
参考文献：Xu D, Zhang L. Metabolic engineering of Escherichia coli for agmatine production. Eng Life Sci. 2018 Oct 4;19(1):13-20.
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大肠杆菌胍丁胺生产的代谢工程
以JM109基因组DNA为模板，使用正向引物speA-F和反向引物speA-R通过PCR生成speA的开放阅读框。正向引物speA-C在其5'末端有一个EcoRI位点，反向引物speA-5在其5'-末端有个HindIII位点。用EcoRI和HindIII消化speA片段，并将其连接到同样消化的pKK223-3中，产生重组表达载体pKK223-3-speA。将pKK223-3-speA转化到菌株AUX4中并将所得菌株命名为AUX5。通过SDS-PAGE和活性分析确定编码ADC的speA基因的表达。
参考文献：Xu D, Zhang L. Metabolic engineering of Escherichia coli for agmatine production. Eng Life Sci. 2018 Oct 4;19(1):13-20.
