在选定的工程巴斯德毕赤酵母菌株中过表达了P.pas的内源性l-缬氨酸生物合成途径基因，并增强了2-酮酸降解途径（图4b）。这两个基因PpIlv6和PpIlv2（每个都编码乙酰乳酸合酶的不同亚基）通过自切割2A肽序列连接在一起，并放置在整合表达质粒pGAP-Neo中的GAP启动子后面。剩下的两个基因，PpIlv5和PpIlv3，也通过自切割2A肽序列连接在一起，并放置在整合表达质粒pGAP-Hyg中的GAP前体后面。
参考文献：Siripong W, Wolf P, Kusumoputri TP, Downes JJ, Kocharin K, Tanapongpipat S, Runguphan W. Metabolic engineering of Pichia pastoris for production of isobutanol and isobutyl acetate. Biotechnol Biofuels. 2018 Jan 8;11:1.
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在选定的工程巴斯德毕赤酵母菌株中过表达了P.pas的内源性l-缬氨酸生物合成途径基因，并增强了2-酮酸降解途径（图4b）。这两个基因PpIlv6和PpIlv2（每个都编码乙酰乳酸合酶的不同亚基）通过自切割2A肽序列连接在一起，并放置在整合表达质粒pGAP-Neo中的GAP启动子后面。剩下的两个基因，PpIlv5和PpIlv3，也通过自切割2A肽序列连接在一起，并放置在整合表达质粒pGAP-Hyg中的GAP前体后面。
参考文献：Siripong W, Wolf P, Kusumoputri TP, Downes JJ, Kocharin K, Tanapongpipat S, Runguphan W. Metabolic engineering of Pichia pastoris for production of isobutanol and isobutyl acetate. Biotechnol Biofuels. 2018 Jan 8;11:1.
