所有质粒均采用金门DNA组装法构建，并在大肠杆菌DH5α中扩增。然后如前所述电转化为谷氨酸梭菌ATCC 13032或ATCC 21850。为了构建pEC-vioABCDE，用引物从紫锥虫基因组DNA中PCR扩增vio操纵子。分别用引物从pEC-XK99E中扩增组装片段pEC-ΔlacIq-P1和pEC-ΔlacIq-P2。为了构建质粒pEC-J-vio1，使用引物从青青虫的染色体DNA中PCR扩增了vio操纵子。将pEC-XK99E的主干分为两个片段，分别使用引物对进行扩增。为了构建质粒pEC-J-vio2，分别用引物从染色体DNA中PCR扩增出青青柠的vioA、vioB、vioC、vioD、vioE生物合成基因。使用引物克隆骨架。为了构建pEC-C-vio1，分别使用引物PCR扩增vio操纵子。用引物中克隆骨架。为了构建pEC-C-vio2，用PCR从pKMV-vioB、pKMV-violA、pKMV-vioE、pKMV-vioC、pKMV-ioD中扩增vioB、vioA、vioE、vioC、vioD。
参考文献：Sun H, Zhao D, Xiong B, Zhang C, Bi C. Engineering Corynebacterium glutamicum for violacein hyper production. Microb Cell Fact. 2016 Aug 24;15(1):148.
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所有质粒均采用金门DNA组装法构建，并在大肠杆菌DH5α中扩增。然后如前所述电转化为谷氨酸梭菌ATCC 13032或ATCC 21850。为了构建pEC-vioABCDE，用引物从紫锥虫基因组DNA中PCR扩增vio操纵子。分别用引物从pEC-XK99E中扩增组装片段pEC-ΔlacIq-P1和pEC-ΔlacIq-P2。为了构建质粒pEC-J-vio1，使用引物从青青虫的染色体DNA中PCR扩增了vio操纵子。将pEC-XK99E的主干分为两个片段，分别使用引物对进行扩增。为了构建质粒pEC-J-vio2，分别用引物从染色体DNA中PCR扩增出青青柠的vioA、vioB、vioC、vioD、vioE生物合成基因。使用引物克隆骨架。为了构建pEC-C-vio1，分别使用引物PCR扩增vio操纵子。用引物中克隆骨架。为了构建pEC-C-vio2，用PCR从pKMV-vioB、pKMV-violA、pKMV-vioE、pKMV-vioC、pKMV-ioD中扩增vioB、vioA、vioE、vioC、vioD。
参考文献：Sun H, Zhao D, Xiong B, Zhang C, Bi C. Engineering Corynebacterium glutamicum for violacein hyper production. Microb Cell Fact. 2016 Aug 24;15(1):148.
