为了从APS963中恢复pobA,使用引物通过PCR从谷氨酸棒杆菌ATCC 13032的基因组DNA中获得pobA基因(1.2 kb)和上游和下游区域。使用Gibson组装将扩增片段克隆到HindIII/XbaI处理的pK19mobsacB中,以产生pK19-pobA。质粒pK19-ΔvanAB是通过使用引物组P-vanA-F/P-vanA-R和P-vanB-F/P-vanB-R获得的PCR片段与HindIII/EcoRI消化的pK19mobsacB融合而构建的。

参考文献:Kim HS, Choi JA, Kim BY, Ferrer L, Choi JM, Wendisch VF, Lee JH. Engineered Corynebacterium glutamicum as the Platform for the Production of Aromatic Aldehydes. Front Bioeng Biotechnol. 2022 May 12;10:880277.
为了从APS963中恢复pobA,使用引物通过PCR从谷氨酸棒杆菌ATCC 13032的基因组DNA中获得pobA基因(1.2 kb)和上游和下游区域。使用Gibson组装将扩增片段克隆到HindIII/XbaI处理的pK19mobsacB中,以产生pK19-pobA。质粒pK19-ΔvanAB是通过使用引物组P-vanA-F/P-vanA-R和P-vanB-F/P-vanB-R获得的PCR片段与HindIII/EcoRI消化的pK19mobsacB融合而构建的。

参考文献:Kim HS, Choi JA, Kim BY, Ferrer L, Choi JM, Wendisch VF, Lee JH. Engineered Corynebacterium glutamicum as the Platform for the Production of Aromatic Aldehydes. Front Bioeng Biotechnol. 2022 May 12;10:880277.