谷氨酸棒杆菌基因组中catB基因（NCgl2318）缺失的遗传构建体包含703bp的靶基因DNA片段缺失和作为同源重组位点的500bp大小的侧翼区域。对于catA基因（NCgl2319）的过表达，遗传构建体由结构tuf基因（NCgl0480）启动子的200 bp片段和作为同源重组位点的500 bp大小的侧翼区域组成。通过BamHI限制性内切酶将载体线性化，然后用采用Gibson方法进行组装。在大肠杆菌菌株Stellar和NM522中进行载体扩增，纯化质粒DNA，并将质粒转化进大肠杆菌和谷氨酸梭菌菌株。
参考文献：Becker J, Kuhl M, Kohlstedt M, Starck S, Wittmann C. Metabolic engineering of Corynebacterium glutamicum for the production of cis, cis-muconic acid from lignin. Microb Cell Fact. 2018 Jul 20;17(1):115.
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谷氨酸棒杆菌基因组中catB基因（NCgl2318）缺失的遗传构建体包含703bp的靶基因DNA片段缺失和作为同源重组位点的500bp大小的侧翼区域。对于catA基因（NCgl2319）的过表达，遗传构建体由结构tuf基因（NCgl0480）启动子的200 bp片段和作为同源重组位点的500 bp大小的侧翼区域组成。通过BamHI限制性内切酶将载体线性化，然后用采用Gibson方法进行组装。在大肠杆菌菌株Stellar和NM522中进行载体扩增，纯化质粒DNA，并将质粒转化进大肠杆菌和谷氨酸梭菌菌株。
参考文献：Becker J, Kuhl M, Kohlstedt M, Starck S, Wittmann C. Metabolic engineering of Corynebacterium glutamicum for the production of cis, cis-muconic acid from lignin. Microb Cell Fact. 2018 Jul 20;17(1):115.
