引物长度一般为18-22，根据不同的实验，长度也没有什么限制。上下游引物的Tm值越接近越好，最好不超过1，但大小没什么限制。根据不同引物的长度，Tm值差距挺大的。一般情况，GC含量为45%-50%，但现在的很多酶的活性很好，这一条不需要考虑太多。后面是发卡结构和自身形成环的参数，可看可不看，影响不大。
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引物长度一般为18-22，根据不同的实验，长度也没有什么限制。上下游引物的Tm值越接近越好，最好不超过1，但大小没什么限制。根据不同引物的长度，Tm值差距挺大的。一般情况，GC含量为45%-50%，但现在的很多酶的活性很好，这一条不需要考虑太多。后面是发卡结构和自身形成环的参数，可看可不看，影响不大。
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