对来自耻垢分枝杆菌ATCC 19420、嗜盐芽孢杆菌ATCC 700290、天蓝色链霉菌A3、长盐单胞菌ATCC 33173、施氏假单胞菌A1501、Gracilibacil lus sp.SCU50、嗜酸隐球菌JF5、嗜碱杆菌clausii 7520-2、嗜烃硬粒藻KTC 62334、嗜碱甲基微杆菌DSM 19304、嗜螺单胞菌LHW37的胞外羟化酶基因进行密码子优化。用特异性引物扩增获得的基因，并在组成型tuf启动子的控制下通过Gibson Assembly将每个基因克隆到pClik 5α和pCES PLPV载体中，分别用KpnI/SalI和SalI/XbaI切割。在tuf启动子的控制下，将每个基因克隆到pCES-PLPV载体中，然后用SalI和BamHI切割。然后在大肠杆菌DH10B中扩增质粒，分离并通过电穿孔转化到谷氨酸梭菌中。
参考文献：Jungmann L, Hoffmann SL, Lang C, De Agazio R, Becker J, Kohlstedt M, Wittmann C. High-efficiency production of 5-hydroxyectoine using metabolically engineered Corynebacterium glutamicum. Microb Cell Fact. 2022 Dec 28;21(1):274.
技术服务 Technology Services
联系我们
CONTACT US
-
0574-87917803
服务热线 -
testobio@163.com
邮箱
对来自耻垢分枝杆菌ATCC 19420、嗜盐芽孢杆菌ATCC 700290、天蓝色链霉菌A3、长盐单胞菌ATCC 33173、施氏假单胞菌A1501、Gracilibacil lus sp.SCU50、嗜酸隐球菌JF5、嗜碱杆菌clausii 7520-2、嗜烃硬粒藻KTC 62334、嗜碱甲基微杆菌DSM 19304、嗜螺单胞菌LHW37的胞外羟化酶基因进行密码子优化。用特异性引物扩增获得的基因，并在组成型tuf启动子的控制下通过Gibson Assembly将每个基因克隆到pClik 5α和pCES PLPV载体中，分别用KpnI/SalI和SalI/XbaI切割。在tuf启动子的控制下，将每个基因克隆到pCES-PLPV载体中，然后用SalI和BamHI切割。然后在大肠杆菌DH10B中扩增质粒，分离并通过电穿孔转化到谷氨酸梭菌中。
参考文献：Jungmann L, Hoffmann SL, Lang C, De Agazio R, Becker J, Kohlstedt M, Wittmann C. High-efficiency production of 5-hydroxyectoine using metabolically engineered Corynebacterium glutamicum. Microb Cell Fact. 2022 Dec 28;21(1):274.
