使用自杀质粒pKR6K24通过等位基因交换产生阴沟肠杆菌SDM突变体。从阴沟肠杆菌SDM中扩增出左右侧翼序列，然后通过PCR连接，使用引物对获得DbudA片段。将凝胶纯化的DbudA片段连接到用EcoRI和BamHI消化的pKR6K载体上。所得质粒被命名为pKDbudA。
参考文献：Zhang L, Zhang Y, Liu Q, Meng L, Hu M, Lv M, Li K, Gao C, Xu P, Ma C. Production of diacetyl by metabolically engineered Enterobacter cloacae. Sci Rep. 2015 Mar 12;5:9033.
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用代谢工程的阴沟肠杆菌生产二乙酰
使用自杀质粒pKR6K24通过等位基因交换产生阴沟肠杆菌SDM突变体。从阴沟肠杆菌SDM中扩增出左右侧翼序列，然后通过PCR连接，使用引物对获得DbudA片段。将凝胶纯化的DbudA片段连接到用EcoRI和BamHI消化的pKR6K载体上。所得质粒被命名为pKDbudA。
参考文献：Zhang L, Zhang Y, Liu Q, Meng L, Hu M, Lv M, Li K, Gao C, Xu P, Ma C. Production of diacetyl by metabolically engineered Enterobacter cloacae. Sci Rep. 2015 Mar 12;5:9033.
