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使用trc启动子驱动的反馈抗性基因trpES40F替换HTP06内源性色氨酸操纵子的trpE基因、启动子和前肽(trpL)序列,以解除L-Trp对主要限速酶邻氨基苯甲酸合成酶的负反馈,并增强内源性色氨酸酯操纵器的表达,从而产生HTP07。3-脱氧-D-阿拉伯基庚糖酸-7-磷酸(DAHP)合酶的反应催化磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和赤玫瑰-4-磷酸(E4P)缩合形成DAHP。该酶的三种同工酶由aroG、aroF和aroH基因编码,其中aroG基因编码的同工酶约占总酶活性的79%。为了有效地将PEP和E4P导入L-Trp生物合成途径,由trc启动子驱动的反馈抗性基因aroGS180F被整合到HTP07基因组的yjiV位点,从而产生HTP08。trc启动子控制的反馈抗性基因serAH344A/N364A被整合到HTP08的ycgH假基因座中,从而产生菌株HTP09。

图片81.png

参考文献:Zhang Z, Yu Z, Wang J, Yu Y, Li L, Sun P, Fan X, Xu Q. Metabolic engineering of Escherichia coli for efficient production of L-5-hydroxytryptophan from glucose. Microb Cell Fact. 2022 Sep 24;21(1):198.

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利用葡萄糖生产L-5-羟色氨酸的大肠杆菌代谢工程

使用trc启动子驱动的反馈抗性基因trpES40F替换HTP06内源性色氨酸操纵子的trpE基因、启动子和前肽(trpL)序列,以解除L-Trp对主要限速酶邻氨基苯甲酸合成酶的负反馈,并增强内源性色氨酸酯操纵器的表达,从而产生HTP07。3-脱氧-D-阿拉伯基庚糖酸-7-磷酸(DAHP)合酶的反应催化磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和赤玫瑰-4-磷酸(E4P)缩合形成DAHP。该酶的三种同工酶由aroG、aroF和aroH基因编码,其中aroG基因编码的同工酶约占总酶活性的79%。为了有效地将PEP和E4P导入L-Trp生物合成途径,由trc启动子驱动的反馈抗性基因aroGS180F被整合到HTP07基因组的yjiV位点,从而产生HTP08。trc启动子控制的反馈抗性基因serAH344A/N364A被整合到HTP08的ycgH假基因座中,从而产生菌株HTP09。

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参考文献:Zhang Z, Yu Z, Wang J, Yu Y, Li L, Sun P, Fan X, Xu Q. Metabolic engineering of Escherichia coli for efficient production of L-5-hydroxytryptophan from glucose. Microb Cell Fact. 2022 Sep 24;21(1):198.

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