①菌种活化：将酵母菌种接种在5 % YPD 固体斜面上，30 ℃恒温培养1 d， 重复2 次。用灭菌牙签挑取适量活化的酵母菌斑接种于5 mL 液体YPD 培养基中，于30℃、200 r/min 摇床震荡培养12～16 h，此时可达到对数生长期。

②初筛：取上述活化菌液100 μL，置于5 mL PDA 培养基3 种不同的液体培养基中，于30℃、200 r/min 摇床震荡培养12～16 h，分别稀释为10 万倍和100 万倍2 个浓度梯度， 取50 μL 稀释液涂布到相应的固体PDA 培养基平皿中，30 ℃恒温培养2 d， 观察并记录菌落生长情况。

③复筛：挑出光滑圆润、色泽乳白、形状规则且较大的菌斑，用牙签挑取少许置于5 mL PDA液体培养基中，30 ℃ 200 r/min 摇培过夜。取1.5 mL 菌液3500 r/min 离心5 min 得菌体，加入1 mL PDA液体培养基重悬，山梨醇、甘油处理过夜。取1 mL 处理后的菌液离心得菌体，分别加入1 mLPDA液体培养基重悬，稀释10 万倍后涂布在固体PDA培养基上，30 ℃恒温培养，3 d后观察记录。