在每个PDC同工酶（PDC1、PDC5和PDC6）的开放阅读框的中间引入终止密码子（TAA）。使用四重营养缺陷型菌株（4-JHS200）作为PDC破坏的亲本菌株。首先，在4-JHS200菌株中分别破坏PDC1、PDC5和PDC6，导致单个PDC破坏菌株（4-PDC1d、4-PDC5d和4-PDC6d）。其次，使用相同的方法对4-PDC1d和4-PDC5d菌株进行PDC6的额外破坏。从p426TDH_Llnox质粒中扩增出NADH氧化酶的表达片段。这种NADH氧化酶（noxE）的表达盒被引入4-PDC16d和4-PDC56d菌株的ADH1染色体中部，导致ADH1缺失，noxE表达。所得菌株分别命名为YG01和YG02。特别是将强启动子下含有alsS、alsD和BDH1的质粒p413_SDB导入YG01和YG02菌株中。利用alsS编码的α-乙酰乳酸合成酶，将丙酮酸中的碳融合物重定向为α-乙酰乳酸。10，α-乙酰乳酸通过alsD编码的α-乙酰乳酸脱羧酶转化为乙酰蛋白。BDH1编码的Te丁二醇脱氢酶将乙酰蛋白转化为2,3-BDO。得到的Te菌株被命名为YG01_SDB和YG02_SDB。
参考文献：Lee YG, Seo JH. Production of 2,3-butanediol from glucose and cassava hydrolysates by metabolically engineered industrial polyploid Saccharomyces cerevisiae. Biotechnol Biofuels. 2019 Aug 29;12:204.
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在每个PDC同工酶（PDC1、PDC5和PDC6）的开放阅读框的中间引入终止密码子（TAA）。使用四重营养缺陷型菌株（4-JHS200）作为PDC破坏的亲本菌株。首先，在4-JHS200菌株中分别破坏PDC1、PDC5和PDC6，导致单个PDC破坏菌株（4-PDC1d、4-PDC5d和4-PDC6d）。其次，使用相同的方法对4-PDC1d和4-PDC5d菌株进行PDC6的额外破坏。从p426TDH_Llnox质粒中扩增出NADH氧化酶的表达片段。这种NADH氧化酶（noxE）的表达盒被引入4-PDC16d和4-PDC56d菌株的ADH1染色体中部，导致ADH1缺失，noxE表达。所得菌株分别命名为YG01和YG02。特别是将强启动子下含有alsS、alsD和BDH1的质粒p413_SDB导入YG01和YG02菌株中。利用alsS编码的α-乙酰乳酸合成酶，将丙酮酸中的碳融合物重定向为α-乙酰乳酸。10，α-乙酰乳酸通过alsD编码的α-乙酰乳酸脱羧酶转化为乙酰蛋白。BDH1编码的Te丁二醇脱氢酶将乙酰蛋白转化为2,3-BDO。得到的Te菌株被命名为YG01_SDB和YG02_SDB。
参考文献：Lee YG, Seo JH. Production of 2,3-butanediol from glucose and cassava hydrolysates by metabolically engineered industrial polyploid Saccharomyces cerevisiae. Biotechnol Biofuels. 2019 Aug 29;12:204.
