使用自杀质粒pKR6KCm通过等位基因交换产生 PDL-0的敲除突变体。扩增出肺炎克雷伯菌左右侧翼序列，使用引物通过PCR连接获得Δpox片段。将凝胶纯化的Δpox片段连接到用EcoRI和BamHI消化的pKR6KCm上。所得质粒命名为pKDΔpox，并引入大肠杆菌S17-1。
参考文献：Meng W, Zhang Y, Cao M, Zhang W, Lü C, Yang C, Gao C, Xu P, Ma C. Efficient 2,3-butanediol production from whey powder using metabolically engineered Klebsiella oxytoca. Microb Cell Fact. 2020 Aug 10;19(1):162.
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利用代谢工程的氧化克雷伯氏菌从乳清粉中生产2,3-丁二醇
使用自杀质粒pKR6KCm通过等位基因交换产生 PDL-0的敲除突变体。扩增出肺炎克雷伯菌左右侧翼序列，使用引物通过PCR连接获得Δpox片段。将凝胶纯化的Δpox片段连接到用EcoRI和BamHI消化的pKR6KCm上。所得质粒命名为pKDΔpox，并引入大肠杆菌S17-1。
参考文献：Meng W, Zhang Y, Cao M, Zhang W, Lü C, Yang C, Gao C, Xu P, Ma C. Efficient 2,3-butanediol production from whey powder using metabolically engineered Klebsiella oxytoca. Microb Cell Fact. 2020 Aug 10;19(1):162.
