从酿酒酵母CEN PK2-1C基因组中扩增出启动子和终止子。通过聚合酶链式反应（PCR）获得靶片段和载体，转化到感受态大肠杆菌中。根据酿酒酵母的表达偏好，合成了异源基因crtE、crtB、crtI、crtYB和blh，并通过GENEWIZ对密码子进行了优化。通过PCR获得目标异源基因片段、筛选标签以及上游和下游同源臂，然后转化到酿酒酵母感受态S6中。在30℃下在SD琼脂平板上培养酿酒酵母，以选择具有营养缺乏标记的转化体，并获得视黄醇生产菌株A01。
参考文献：Wang X, Xu X, Liu J, Liu Y, Li J, Du G, Lv X, Liu L. Metabolic Engineering of Saccharomyces cerevisiae for Efficient Retinol Synthesis. J Fungi (Basel). 2023 Apr 26;9(5):512.
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从酿酒酵母CEN PK2-1C基因组中扩增出启动子和终止子。通过聚合酶链式反应（PCR）获得靶片段和载体，转化到感受态大肠杆菌中。根据酿酒酵母的表达偏好，合成了异源基因crtE、crtB、crtI、crtYB和blh，并通过GENEWIZ对密码子进行了优化。通过PCR获得目标异源基因片段、筛选标签以及上游和下游同源臂，然后转化到酿酒酵母感受态S6中。在30℃下在SD琼脂平板上培养酿酒酵母，以选择具有营养缺乏标记的转化体，并获得视黄醇生产菌株A01。
参考文献：Wang X, Xu X, Liu J, Liu Y, Li J, Du G, Lv X, Liu L. Metabolic Engineering of Saccharomyces cerevisiae for Efficient Retinol Synthesis. J Fungi (Basel). 2023 Apr 26;9(5):512.
