将天然大肠杆菌乙酰辅酶a羧化酶的四个亚基克隆到单个表达载体pACYCDuet-1中，得到pA-acc。从巨型芽孢杆菌ATCC 14581基因组DNA中PCR扩增CYP102A1基因，并将其克隆到载体pET28a的限制位点NcoI/EcoRI，得到pE-A1。从大肠杆菌K12基因组中扩增出'tesA基因，并将其克隆到载体pET30a的限制位点NdeI/BglII中，得到pE-'tesA。然后使用pE-’tesA作为模板和引物对进行PCR反应，扩增T7启动子序列和’tesA结构基因。然后将PCR产物T7'tesA克隆到EocRI和XhoI位点之间的pE-A1中，以创建pE-A1'tesA，用于这两个基因的共表达。
参考文献：Cao Y, Cheng T, Zhao G, Niu W, Guo J, Xian M, Liu H. Metabolic engineering of Escherichia coli for the production of hydroxy fatty acids from glucose. BMC Biotechnol. 2016 Mar 8;16:26.
技术服务 Technology Services
联系我们
CONTACT US
-
0574-87917803
服务热线 -
testobio@163.com
邮箱
将天然大肠杆菌乙酰辅酶a羧化酶的四个亚基克隆到单个表达载体pACYCDuet-1中，得到pA-acc。从巨型芽孢杆菌ATCC 14581基因组DNA中PCR扩增CYP102A1基因，并将其克隆到载体pET28a的限制位点NcoI/EcoRI，得到pE-A1。从大肠杆菌K12基因组中扩增出'tesA基因，并将其克隆到载体pET30a的限制位点NdeI/BglII中，得到pE-'tesA。然后使用pE-’tesA作为模板和引物对进行PCR反应，扩增T7启动子序列和’tesA结构基因。然后将PCR产物T7'tesA克隆到EocRI和XhoI位点之间的pE-A1中，以创建pE-A1'tesA，用于这两个基因的共表达。
参考文献：Cao Y, Cheng T, Zhao G, Niu W, Guo J, Xian M, Liu H. Metabolic engineering of Escherichia coli for the production of hydroxy fatty acids from glucose. BMC Biotechnol. 2016 Mar 8;16:26.
