利用引物分别从IAM1183的脱氧核糖核酸中扩增出ppc基因的上游和下游同源臂并重叠延伸PCR反应融合两个扩增片段。为了创建质粒pLO3-ppc，将上述片段连接到用相同的酶（Sac I/Xba I）消化pLO3载体中。将质粒pLO3-ppc给予大肠杆菌S17-1，产生大肠杆菌S17-1/pL03-ppc菌株。以大肠杆菌HB101/pRK2013为辅助菌株，pLO3-ppc自杀载体通过三亲交配从大肠杆菌S17-1/pLO3-ppc传播到产气大肠杆菌中。
参考文献：Lu P, Bai R, Gao T, Chen J, Jiang K, Zhu Y, Lu Y, Zhang S, Xu F, Zhao H. Systemic metabolic engineering of Enterobacter aerogenes for efficient 2,3-butanediol production. Appl Microbiol Biotechnol. 2024 Jan 19;108(1):146.
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利用引物分别从IAM1183的脱氧核糖核酸中扩增出ppc基因的上游和下游同源臂并重叠延伸PCR反应融合两个扩增片段。为了创建质粒pLO3-ppc，将上述片段连接到用相同的酶（Sac I/Xba I）消化pLO3载体中。将质粒pLO3-ppc给予大肠杆菌S17-1，产生大肠杆菌S17-1/pL03-ppc菌株。以大肠杆菌HB101/pRK2013为辅助菌株，pLO3-ppc自杀载体通过三亲交配从大肠杆菌S17-1/pLO3-ppc传播到产气大肠杆菌中。
参考文献：Lu P, Bai R, Gao T, Chen J, Jiang K, Zhu Y, Lu Y, Zhang S, Xu F, Zhao H. Systemic metabolic engineering of Enterobacter aerogenes for efficient 2,3-butanediol production. Appl Microbiol Biotechnol. 2024 Jan 19;108(1):146.
