扩增酿酒酵母TDH3启动子（PTDH3），araA基因和ADH1终止子（TADH1），构建araA表达盒。用凝胶中纯化扩增的三个片段。使用该混合物进行使用SpeI5-Ptdh3和3 Tadh1SpeI寡核苷酸的PCR。将得到的PTDH3-araA-TADH1盒进行凝胶纯化，在5’和3’SpeI位点切割，然后连接到NheI消化的pAKX002中，得到质粒pRW230。araD构建体是通过首先扩增HXT7启动子（PHXT7），araD基因和PGI1终止区（TPGI）而制成的。将得到的PHXT7-araD-TPGI1盒进行凝胶纯化，在5’和3’SalI位点切割，然后连接到XhoI消化的pRW230中，得到质粒pRW231。
参考文献：Wisselink HW, Toirkens MJ, del Rosario Franco Berriel M, Winkler AA, van Dijken JP, Pronk JT, van Maris AJ. Engineering of Saccharomyces cerevisiae for efficient anaerobic alcoholic fermentation of L-arabinose. Appl Environ Microbiol. 2007 Aug;73(15):4881-91.
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扩增酿酒酵母TDH3启动子（PTDH3），araA基因和ADH1终止子（TADH1），构建araA表达盒。用凝胶中纯化扩增的三个片段。使用该混合物进行使用SpeI5-Ptdh3和3 Tadh1SpeI寡核苷酸的PCR。将得到的PTDH3-araA-TADH1盒进行凝胶纯化，在5’和3’SpeI位点切割，然后连接到NheI消化的pAKX002中，得到质粒pRW230。araD构建体是通过首先扩增HXT7启动子（PHXT7），araD基因和PGI1终止区（TPGI）而制成的。将得到的PHXT7-araD-TPGI1盒进行凝胶纯化，在5’和3’SalI位点切割，然后连接到XhoI消化的pRW230中，得到质粒pRW231。
参考文献：Wisselink HW, Toirkens MJ, del Rosario Franco Berriel M, Winkler AA, van Dijken JP, Pronk JT, van Maris AJ. Engineering of Saccharomyces cerevisiae for efficient anaerobic alcoholic fermentation of L-arabinose. Appl Environ Microbiol. 2007 Aug;73(15):4881-91.
