通过PCR从运动链霉菌和酿酒酵母中获得pdc和adh基因。将扩增的基因纯化并用适当的限制性内切酶消化，然后连接到pHY300PLK中，在Tet启动子的控制下，使用Z.mobilis-pdc和adhII或Z.mobili-pdc和酿酒酵母adhI制造人工操纵子。因此，构建了两个重组质粒，即pHYpdcZ-adhZ和pHYpdc-Z-adhS。此外，还构建了另外两个质粒，包括pHY（pdcZ-adhS）和另一个质粒pHYpdcZ-（adhS）中的操纵子，前者含有两个拷贝的pdcZhand-adhS，后者含有一个拷贝的pdcZ，但含有两个副本的adhS。此外，通过在pHY300PLK12中连续克隆基因，使用运动链霉菌pdc和酿酒酵母adh合成了两个融合基因。基因以交替的方向融合，而第一基因的终止核苷酸和第二基因的起始核苷酸被删除。因此，构建了两个质粒，即pHYpdcZ:adhS和pHYadhS:pdcZ。
参考文献：Maleki F, Changizian M, Zolfaghari N, Rajaei S, Noghabi KA, Zahiri HS. Consolidated bioprocessing for bioethanol production by metabolically engineered Bacillus subtilis strains. Sci Rep. 2021 Jul 2;11(1):13731.
技术服务 Technology Services
联系我们
CONTACT US
-
0574-87917803
服务热线 -
testobio@163.com
邮箱
通过PCR从运动链霉菌和酿酒酵母中获得pdc和adh基因。将扩增的基因纯化并用适当的限制性内切酶消化，然后连接到pHY300PLK中，在Tet启动子的控制下，使用Z.mobilis-pdc和adhII或Z.mobili-pdc和酿酒酵母adhI制造人工操纵子。因此，构建了两个重组质粒，即pHYpdcZ-adhZ和pHYpdc-Z-adhS。此外，还构建了另外两个质粒，包括pHY（pdcZ-adhS）和另一个质粒pHYpdcZ-（adhS）中的操纵子，前者含有两个拷贝的pdcZhand-adhS，后者含有一个拷贝的pdcZ，但含有两个副本的adhS。此外，通过在pHY300PLK12中连续克隆基因，使用运动链霉菌pdc和酿酒酵母adh合成了两个融合基因。基因以交替的方向融合，而第一基因的终止核苷酸和第二基因的起始核苷酸被删除。因此，构建了两个质粒，即pHYpdcZ:adhS和pHYadhS:pdcZ。
参考文献：Maleki F, Changizian M, Zolfaghari N, Rajaei S, Noghabi KA, Zahiri HS. Consolidated bioprocessing for bioethanol production by metabolically engineered Bacillus subtilis strains. Sci Rep. 2021 Jul 2;11(1):13731.
