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2022-05-07 06:27:13       好想做条狗

假阳性可以通过NTC(No Template Control)做测试
一般的LAMP实验能做到10-100copies/reaction,,,运气好的时候设计的引物能到个位数
不过个位数copy的检出需要重复,并计算95%检出率的置信区间
总的来说,LAMP极其容易出现假阳性,所以一旦出现,必须更换引物、试剂,引物尤其是FIP、BIP最好是HPLC纯化的
LAMP的FIP、BIP极易出现引物二聚体,这个正常
都能P出来,那你得看看是不是以下问题:
1.FIP、BIP中的F1c、B1c那个方向对不对---如果是primer explorer设计的话不会错,手工设计的时候有时候会粗心
2.有没有在反应中使用loop引物---有时候设计不理想,灵敏度会很低,这时候往往需要通过延长反应时间或者添加loop引物
3.反应体系是自配还是试剂盒,如果自配的不好就可以试试试剂盒,国产的比鬼子的便宜不少
4.以上都不行,那就换一套吧


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