如果构建的载体没有问题，出现卫星菌落一般考虑一下几个方面：一是抗生素出了问题；二是操作出了问题。抗生素放置时间过长或者温度过高，也可能是紫外线灯因素影响，会出现失效的可能。在加氨苄的平板上涂布菌液时，可能由于氨苄浓度太低或者局部菌液太多，出现卫星菌落情况。如果以上所有问题都已经排除还是出现卫星菌落，建议挑去卫星菌落中间较大的菌落，成功率也还是比较高的。
Amp通常情况是不会出现问题。出现卫星菌落对Amp抗性的菌是很正常的情况，是由Amp的抗性原理决定，看看pET载体使用手册中Amp的注意事项。
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