可以从以下几个方面思考解决思路: 1、诱导表达条件的优化、IPTG浓度、诱导温度、时间等 2、尝试不同表达载体, 特别是N端有融合蛋白的载体 3、His-tag被操作过程混入的重金属离子所饱和,可以通过添加0.5 mM EDTA来去除重金属离子的干扰 4、检查是不是蛋白质的合成提前中止了?(富含Arg精氨酸, Ile异亮氨酸, Leu亮氨酸, Pro脯氨酸这几种氨基酸)
可以从以下几个方面思考解决思路: 1、诱导表达条件的优化、IPTG浓度、诱导温度、时间等 2、尝试不同表达载体, 特别是N端有融合蛋白的载体 3、His-tag被操作过程混入的重金属离子所饱和,可以通过添加0.5 mM EDTA来去除重金属离子的干扰 4、检查是不是蛋白质的合成提前中止了?(富含Arg精氨酸, Ile异亮氨酸, Leu亮氨酸, Pro脯氨酸这几种氨基酸)
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