甘油菌接种： 1. 从-80冰箱中取出甘油菌种，立即放置在37-45℃水浴中快速融化并适当摇动，直至管内甘油菌液全部溶解。 2. 无菌操作下打开甘油管，用无菌滴管将菌种转移到新鲜的培养基上进行培养。 3. 建议一管甘油菌种接种两个15cm试管斜面或两个90mm平板。 4. 避免反复冻融。 甘油菌制备： 1.配置百分之20的甘油（20ml丙三醇加入蒸馏水，定容到100ml），121度15min灭菌后备用。 2.无菌滴管吸取甘油把培养基表面的菌种冲洗下来，形成菌悬液。 3.吸取菌悬液，分装到冻存管中，放入负80度冰箱。 4.制备的用到的所有耗材，都要121°15min灭菌。