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提出了一种将原生质体转化法和电穿孔法相结合的转化方法,即地衣芽孢杆菌原生质体电转化法。该方法一方面利用了原生质体脱壁的特性,有效减少了DNA的穿透阻力;另一方面利用瞬时电击穿孔的机制增加了质粒DNA进入原生质体细胞的数量,由此提高地衣芽孢杆菌的转化效率。首先通过制备原生质体的方法去掉阻碍外源DNA进入细胞的细胞壁组分,再利用瞬时电压冲击细胞膜产生短暂穿孔,使DNA无需借助凝聚作用而是在电场作用下高效的进入细胞内。这样做一方面减少了DNA的穿膜阻力,另一方面增加了原生质体细胞接收外源DNA的量,因此提高了地衣芽孢杆菌的转化效率。

文献参考:温赛,杨建国. 地衣芽孢杆菌原生质体电转化方法的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(7): 76-82.

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地衣芽孢杆菌原生质体电转化方法

提出了一种将原生质体转化法和电穿孔法相结合的转化方法,即地衣芽孢杆菌原生质体电转化法。该方法一方面利用了原生质体脱壁的特性,有效减少了DNA的穿透阻力;另一方面利用瞬时电击穿孔的机制增加了质粒DNA进入原生质体细胞的数量,由此提高地衣芽孢杆菌的转化效率。首先通过制备原生质体的方法去掉阻碍外源DNA进入细胞的细胞壁组分,再利用瞬时电压冲击细胞膜产生短暂穿孔,使DNA无需借助凝聚作用而是在电场作用下高效的进入细胞内。这样做一方面减少了DNA的穿膜阻力,另一方面增加了原生质体细胞接收外源DNA的量,因此提高了地衣芽孢杆菌的转化效率。

文献参考:温赛,杨建国. 地衣芽孢杆菌原生质体电转化方法的研究[J]. 中国生物工程杂志, 2015, 35(7): 76-82.

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