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2022-06-07 06:09:22       zhimahu

一、菌名

        Anabaena doliolum


二、分类地位

  Anabaena doliolum属于念珠藻科(Nostocaceae) 的项圈藻属(Anabaena),又称鱼腥藻,因其在水中会发出刺鼻的鱼腥味,而其种名doliolum的doli—意思为长头的,与其型态有关。 (附录fig.1)。 

  此属属于蓝绿菌(cyanobacteria)的分支,行断裂生殖(4.3hrs/generation),以其固氮能力闻名,能与特定植物维持共生关系,如:mosquito fern。

  DNA定序完成于1999年,其基因组也已完全被定位出来,有7.2Mb,其DNA的G+C mol%约35~47之间。


三、 自然栖息地

   此菌为淡水藻的一种,多生长在淡水环境中,如:湖泊、养殖鱼池、污水……等,在农田与稻田中也会发现,它的固氮作用使农作物增产,因此又称万年肥,因为藻类提供的养分是取之不尽,用之不竭的。


四、大小型态

  丝状群体由相随的一列细胞组成,称为藻丝(trichome)。

  (a)形状呈直线、曲线,有些突变种为螺旋。

  (b)其细胞常是球形、卵形或圆筒形,大小约2~10μm,而其末端细胞呈圆形或圆锥。

  (c)丝体紧密,活动力强,不会形成菌落。

  (d)无坚硬的厚鞘(sheath),但是有软黏的外壳保护。

  (e)其上面有一种胞子与母细胞壁合为一体,称为厚壁胞子(akinete)(附录fig.2),可以作休眠用,抵抗干燥、冰冻、辐射,等环境适宜时,再发展为新个体。

  (f)在藻丝中间常出现球状或圆柱形的heterocyst (附录fig.3),有固氮的能力。 (附录fig.4)。


五、适合环境

  此菌为兼性异营菌(facultative heterotroph),在阳光下为光合自营菌(photoautotroph),在黑暗时为异营菌(hetertroph),适合生长在25℃左右,pH值7~7.8之间的环境。


六、培养特性

  在一般的cyanobacteria medium 都可生长,较常使用Ashbey's Nitrogen-free Agar培养。

  ★Ashbey's Nitrogen-free Agar 配方

   Agar ...............................................15.0 g

   Mannitol ........................................15.0 g

   CaCl2•2H2O ..............................0.2 g

   K2HPO4 .......................................0.2 g

   MgSO4•7H2O ...........................0.2 g

   MoO3 (10% solution) ...................0.1 ml

   FeCl3 (10% solution) ....................0.05 ml

  Distilled water to 1.0 L, pH 7.2±0.2 at room temperature



   其mannitol提供能量的碳来源,其他则提供Ca、P、K、Mg、 S……等的营养,使其能行固氮作用。 Mo对此菌十分重要,若生长在缺乏Mo的环境之下,会造成生物量变少,且细胞内蛋白质、脂肪、不饱和脂肪酸和叶绿素的含量低,严重影响细胞的生理机能。培养约14天左右,培养基渐渐变黄,表面会有混浊像有薄膜的感觉,取菌于位相差显微镜下观察,会发现有trichome的外观及其成长。

  在NaCl浓度高的培养基,会减少其叶绿素及蛋白质的含量,减少P的吸收,使成长速率降低。可使用Urea-rich Growth Medium培养,因为其heterocyst有行固氮作用的能力,也可以做选择性培养基,当其中的Phenol red变红时,表示N2已转变成NH4+。若其在石油中生长,会抑制NH4+、NO3-、PO43-的吸收。


七、 生化特性

 

Motility   Urease    Catalase    Nitrate reduction

+               +              +                   +

  

(1) 移动性(Motility)高,其trichome 活动力强。

(2) Urease Test:正反应。其有将固氮作用得到的产物利用的能 力。

(3) Catalase Test:正反应。此菌的脂质会行过氧化反应产生过氧化氢,但其本身具有catalase与SOD,故可分解过氧化氢。

(4) Nitrate Reduction Test:正反应。此菌拥有nitrate reductase。

 


八、应用


  萃取此菌制成抗癌药Puwainaphycin C ,可杀死真菌、病毒, 目前有用于治疗鼻咽癌。

  利用此菌可以行固氮作用,增加农作物产量,但杀虫剂会对此菌产生伤害,因此须慎用杀虫剂。例如:

  (a)丁基拉草(Butachlor)和2,4-D会造成此菌大量死亡。

  (b)加保扶(Carbofuran)低浓度对此菌不影响,但高浓度会被水解而断裂。若用80~100ppm,会抑制它们50%以上生长,但是以100ppm持续48小时作用 可以增加它们的固氮能力,所以必须使用适当浓度。

  (c)安杀番(Endosulfan)对此菌完全不会影响。

  此菌在去乙醯壳多糖(chitosan)上,可有效去除废水中的 NO3-、NO2-、PO43-、Cr2O72-。

 


九、参考文献


1.  James T. Staley, Marvin P. Bryant, Norbert pfennig and John G. Holt. 1989. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology Volume3. p.1783-1786.

2.  Ola Hammouda. 1999. Ecotoxicology and Environment Safety44. p.215-219.

3.  A. K. Singh and J. P. Gaur. 1991. Ecotoxicology and Environment Safety21. p.103-108.Surendra Singh. 1990. FEMS Microbiology Letters67. p.79-84.

4.  Surendra Singh. 1990. FEMS Microbiology Letters67. p.79-84.

5.  Springer New York. 1989. March. Current Microbiology. Vol.52. p.55-60.


http://www.springerlink.com/(iqzbg2rdpufazwjlqhhdko45)/app/home/contribution.asp?referrer=parent&backto=issue,18,33;journal,87,132;linkingpublicationresults,1:100229,1


6.  Springer Netherlands. 2002. September. Jornel of Applied Phycology. Vol.10. p.165-170.


 http://www.springerlink.com/(pdojw5nasd4c1wfha3nw3b55)/app/home/contribution.asp?referrer=parent&backto=issue,7,9;journal,42,76;linkingpublicationresults,1:100278,1


7.  Springer Netherlands. 1993. December. World Journal of Microbiology and Biotechnology. Vol.10. p.231-242.


http://www.springerlink.com/(5hfed224turud145vhtmvdqu)/app/home/contribution.asp?referrer=parent&backto=issue,2,15;journal,6,288;linkingpublicationresults,1:100355,1


8.  S. Orme and S. Kegley,PAN Pesticides Database - Chemical Toxicity Studies on Aquatic Organisms.


      http://www.pesticideinfo.org/List_AquireAll.jsp?Species=2952&Effect

9.  Index of Cyanobacteria Medium Recipes for Modern Browsers.


      http://www.cyanosite.bio.purdue.edu/media/table/media.html

10.  Richard E.Moore. http://www.chem.hawaii.edu/UH_Chem/faculty/moore.html

11.  fig.1. http://www-cyanosite.bio.purdue.edu/images/images.html

12.  fig.2. http://www.ibvf.cartuja.csic.es/Cultivos/Seccion_IV.htm

13.  fig.3.http://www.biologybrowser.com/cgibin/search/hyperseek.cgi?ID=1057654089



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