1 细胞准备:96孔板中接种100µ l 293细胞,每孔细胞数约104个,以2% DMEM培养 

2 稀释病毒液准备：以2% DMEM将病毒液稀释成8个较高浓度（如10-3-10-10）， 每个浓度重复10个，每孔加入病毒稀释液100µl。

   另留两排不加病毒液作为阴 性对照。37℃下，孵箱培养10天。

3 10d后观察细胞，记数每排出现CPE的孔数，计算细胞病变率。（如某一浓度 各孔细胞全部病变，比率为1，如无细胞病变，则比率为0）。

4 计算

    T =10×101 + d (S - 0.5) /ml 

    d = Log 10 稀释度（如为10倍稀释℃，d=1）     

    S = 各浓℃细胞病变比率之和