kanMX标记位于Cre重组酶的loxP位点，嵌入ACT1内含子中，得到的模块通过pcr介导的基因破坏靶向特定的基因。用PCR对loxP-kanMX-loxP cassette进行扩增，用SalI剪切扩增产物，克隆到pRX1 中act1内含子的XhoI位点，得到pRKO，将质粒导入酵母细胞，获得菌株 THC82 ura3::intron/kanMX。
参考文献：Cheng TH, Chang CR, Joy P, Yablok S, Gartenberg MR. Controlling gene expression in yeast by inducible site-specific recombination. Nucleic Acids Res. 2000 Dec 15;28(24):E108.
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酿酒酵母内含子模块开发
kanMX标记位于Cre重组酶的loxP位点，嵌入ACT1内含子中，得到的模块通过pcr介导的基因破坏靶向特定的基因。用PCR对loxP-kanMX-loxP cassette进行扩增，用SalI剪切扩增产物，克隆到pRX1 中act1内含子的XhoI位点，得到pRKO，将质粒导入酵母细胞，获得菌株 THC82 ura3::intron/kanMX。
参考文献：Cheng TH, Chang CR, Joy P, Yablok S, Gartenberg MR. Controlling gene expression in yeast by inducible site-specific recombination. Nucleic Acids Res. 2000 Dec 15;28(24):E108.
