使用引物katG-BsaI-fwd和katG-BsaI-rev从大肠杆菌DH10B的基因组DNA中扩增出基因katG。用BsaI切割PCR片段,并将其连接到用相同酶切割的表达载体pASK-IBA3中。在pACYCduet1的第二个多克隆位点上克隆了带有N端His6标签的phuS基因。为了使血红素受体ChuA与血红素蛋白共表达,质粒pHPEX314被用作基本载体。

参考文献:Fiege K, Querebillo CJ, Hildebrandt P, Frankenberg-Dinkel N. Improved Method for the Incorporation of Heme Cofactors into Recombinant Proteins Using Escherichia coli Nissle 1917. Biochemistry. 2018 May 15;57(19):2747-2755.
使用引物katG-BsaI-fwd和katG-BsaI-rev从大肠杆菌DH10B的基因组DNA中扩增出基因katG。用BsaI切割PCR片段,并将其连接到用相同酶切割的表达载体pASK-IBA3中。在pACYCduet1的第二个多克隆位点上克隆了带有N端His6标签的phuS基因。为了使血红素受体ChuA与血红素蛋白共表达,质粒pHPEX314被用作基本载体。

参考文献:Fiege K, Querebillo CJ, Hildebrandt P, Frankenberg-Dinkel N. Improved Method for the Incorporation of Heme Cofactors into Recombinant Proteins Using Escherichia coli Nissle 1917. Biochemistry. 2018 May 15;57(19):2747-2755.