目的: 使用 CRISPR-Cfp1 系统敲除艰难梭菌毒性(PaLoc)毒力基因岛,构建无毒性艰难梭菌菌株。
方法: 使用分子克隆方法,构建针对 PaLoc 毒力岛的基因打靶质粒 pWH53;将 pWH53 质粒转化艰难梭菌 630 菌 株后,诱导 Cpf1 蛋白表达,PCR 筛选发生双交换的 PaLoc 敲除突变株。
目的: 使用 CRISPR-Cfp1 系统敲除艰难梭菌毒性(PaLoc)毒力基因岛,构建无毒性艰难梭菌菌株。
方法: 使用分子克隆方法,构建针对 PaLoc 毒力岛的基因打靶质粒 pWH53;将 pWH53 质粒转化艰难梭菌 630 菌 株后,诱导 Cpf1 蛋白表达,PCR 筛选发生双交换的 PaLoc 敲除突变株。
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