细胞基因敲入
细胞基因敲入的含义
细胞基因敲入作为一种高效、精准的基因功能研究手段，不仅是解析生命本质的核心手段，也是推动生物医药、细胞治疗与工程细胞株优化的关键技术平台。其在基础研究、疾病建模、细胞工程与临床转化中的研究价值将持续扩大。
主流方法CRISPR KI技术是通过CRISPR-Cas9技术对细胞内的基因组DNA产生了双链断裂后，同时引发了细胞内的DNA修复机制，此时为细胞提供额外的同源修复模板，则可以使DNA在修复过程中通过同源重组的方式修复DNA，并引入突变位点或敲入序列。
泰斯拓生物|CRISPR-HM技术平台
难编辑细胞的"克星"
1.革新算法:自主gRNA设计引擎+细胞基因组特征大数据,基因编辑效率提升10-20倍
2.极速筛选:独家高丰度阳性克隆富集方案,比传统方法提前4周锁定理想单克隆
3.广谱适配:已突破300+难转染/难编辑细胞系,成功率行业领先
4.一站式闭环:从Cell Pool效率精准检测、单克隆形成率强化到微量样本高通量基因型鉴定,全流程标准化、自动化
基因敲入细胞服务详情
基因敲入细胞系（Gene KnockIN Cell Line） 是指根据需要敲入的位点，寻找合适的PAM位置（一般为NGG），gRNA的序列尽可能的接近需要敲入的位点，以提高基因重组的效率。
细胞类型
- 肿瘤细胞系
- 免疫细胞系
- 干细胞系
- 其他常用细胞系
交付标准
- PCR检测（常规）
- Sanger测序（常规）
- 自定义（可根据实验需求评估）
编辑类型
- Cell Pool /单克隆纯合子
- 免疫细胞系
- 野生型细胞
- 实验报告
质量控制 QC
- 单基因敲除
- 多基因敲除
细胞基因敲入技术方案
| 方法 | CRISPR KI |
|---|---|
| 载体需求 | 均可 |
| 优势 | 方法成功率高，现有工具成熟 |
| 劣势 | 需要敲入的片段需在PAM位点附近 |
| 针对需求 | 需要对细胞基因改造 |
服务流程及方案适配
FAQs
1. 如何通过优化 Donor模板结构来提升敲入效率？
可适当延长Donor模板两侧的同源臂长度，以增强同源重组效率，从而提高敲入成功率。
2. 如何防止Cas9在敲入完成后对整合位点进行重复切割？
可在Donor模板中引入PAM序列或其邻近区域的同义突变(不改变氨基酸序列)，使整合后的位点不再被Cas9识别，从而避免再次切割。
3. 是否可以对Donor模板进行优化以改善后续基因表达？
可以。对Donor模板中的编码序列进行密码子优化，有助于提升目标基因在宿主细胞中的表达效率和准确性。
