一、菌名

        Clostridium difficile

二、分类地位

      由Holdeman于1977年首度发表，属于芽孢杆菌科(Bacillaceae) 梭孢杆菌属(clostridium)，其属名来自希腊文，意指梭状物(spindle)，种名源自拉丁文difficile，是困难的意思，表示其在分离和研究上都比较困难。

三、自然栖息地

     梭状杆菌的栖息地受其对于氧气的敏感度影响，C. difficile出现在90%一岁以下的婴幼儿的肠道中，属于正常菌丛的一部分，但是出现在30%两岁以下的幼童体内，7-14%成人体内。自然界则可自哺乳类的肠道以及肠道产物、污水以及土壤中分离。

四、大小型态

         革兰氏阳性梭状杆菌，绝对厌氧，宽约0.5-1.9μm，长约3.0-16.9 μm，某些菌株会形成2-6个菌体长的短链。于液态培养机中有移动性。此C. difficile属于产孢菌，其孢子呈圆形，生长在菌体接近终端处，但是仅有极少数的情况会出现在终端。

五、适合环境

          C. difficile属于肠道菌丛的一部份，其最佳生长环境十分近似于人体肠道。最佳生长温度30-37oC，于25-45 oC均有生长的现象，需无氧培养。

六、培养特性

         因披衣菌是属绝对细胞内寄生菌,故不能在人为培养基上生长,收集后的检体需种在活胚胎鸡蛋卵黄囊上生长,或接种在细胞培养之活细胞中,然后再染色观察法较为繁复。

七、生化特性      

在Clostridium difficile的分离以及培养上，经常使用的是Clostridium difficile selective agar(CDSA)。

Fructose agar (CCFA)。样本在经过48小时的无氧培养之后：

(1)CDSA上出现灰色微突丝状边缘且无溶血现象的菌落(Non hemolytic, gray, slightly raised, umbonate with a ground glass likeappearance and filamentous edge)。

(2) CCFA上出现大型微平丝状边缘圆形菌落(Large, slightly flat, circular colonies with a filamentous edge)，且于菌落外有2-3 mm的黄色区域。

(3)Clostridium difficile 可在 blood agar 上生长，其菌落呈圆形大约2~5㎜，菌落表面有光泽，菌落为平面或微凸起状，颜色为灰色或白色。

(4) 适合培养于 peptone-yeast extract-glucose （PYG）broth，在PYG deep agar 中会产气，在PYG broth 中会产生大量氢气。

如果有具有以上特征的菌落则有很大的可能是C. difficile，取其菌落加以次培养后进行以下测试：

革兰氏染色：

        菌体细长的杆菌，革兰氏阳性或是不定性(Variable)，具有圆形近端胞子(subterminal spore)。

氧耐受度测试：

        将菌接种于血液平板于5-7% CO2下培养48小时，应无生长的现象。

        L proline aminopeptidase disk 测试

        99% 的C. difficile为正反应

        如果以上的特性皆符合，则几乎可以确定此菌为C. difficile。

八、应用性

           Clostridium difficile 原来为人体肠道中的正常菌丛，由于其他肠道菌的竞争压抑才使的 Clostridium difficile不易致病。与抗生素使用相关的腹泻中有10～20﹪和C. difficile伺机性感染有关。由于抗生素对于体内正常菌丛的抑制，使得微生物拮抗作(microbial antagonism)用降低，此时C. difficile很容易就会开始大量增生，其结果是由于其所产生的毒素，引起水状的腹泻。其患者可能有以下症状：腹泻、发烧、腹痛、白血球上升、结肠炎、巨结肠(megacolon)等，称作伪膜性结肠炎。有时脱水、电解质流失、败血症、休克甚至死亡。最常造成这样结果的包括Ampicillin、Cephalosporin及Clindamycin等抗生素。经由手或体表传染，Clostridium difficile 会产生两种内毒素，toxin A 和toxin B ，toxin A 会造成肠内液体的聚积，toxin B为cytotoxin，会使微丝断裂和抑制蛋白质的合成。

        其治疗方式包括立即停用造成腹泻的抗生素，补充水分以及电解质，如有必要再加以药物的治疗，如口服或静脉注射Metronidazole或是Vancomycin。

九、参考文献

1. Patric R. Murray. Ellen Jo Baron. Michael A. Pfaller. Fred C. Teover. Pobert H. Yolken. 1999.The genus Clostridium-Nonmedical, The genus Clostridium-medical. Manual of Clinical Microbiology 6th edition. P.1801-P.1839, P.1871

2. Albert Balows.Hans G.Truper.Martin Dwarkin. Wim Harder Karl-Heinz Schleifer.1991. Clostridium. The Prokaryotes volume 2. P.574-P.584

3. David Bergey.（1984）. Bergey’s Manual of systematic Bacteriology volume 2. P.1141-1200

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5. Kenneth J. Ryan（1994）Medical Microbiology ：304

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