首先，用引物phaCAB-F/phaCAB-R克隆phaCAB片段，然后用EcoRI和HindIII酶切，用EcoRI和HindIII酶切，连接在一起，得到质粒pFW01-phaCAB。通过菌落PCR、限制性内切酶切和DNA测序检测pFW01- phaCAB的正确序列，最后将质粒pFW01-phaCAB转化到大肠杆菌菌株TWF001中。
参考文献：Wang J, Ma W, Fang Y, Yang J, Zhan J, Chen S, Wang X. Increasing L-threonine production in Escherichia coli by overexpressing the gene cluster phaCAB. J Ind Microbiol Biotechnol. 2019 Nov;46(11):1557-1568.
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首先，用引物phaCAB-F/phaCAB-R克隆phaCAB片段，然后用EcoRI和HindIII酶切，用EcoRI和HindIII酶切，连接在一起，得到质粒pFW01-phaCAB。通过菌落PCR、限制性内切酶切和DNA测序检测pFW01- phaCAB的正确序列，最后将质粒pFW01-phaCAB转化到大肠杆菌菌株TWF001中。
参考文献：Wang J, Ma W, Fang Y, Yang J, Zhan J, Chen S, Wang X. Increasing L-threonine production in Escherichia coli by overexpressing the gene cluster phaCAB. J Ind Microbiol Biotechnol. 2019 Nov;46(11):1557-1568.
