以枯草芽孢杆菌TD-234m的染色体为模板，分别PCR扩增ribA基因编码序列，cdd基因的串联启动子及前导区，sacB基因上游同源臂、下游同源臂、正向选择标记盒和内部同源片段。最后采用重叠PCR方法拼接出UPcddADCRG片段。将UPcddADCRG片段转化枯草芽孢杆菌LXZ-1感受态细胞，通过枯草芽孢杆菌内部同源片段重组，使其失去抗性标记基因。
参考文献：张续, 班睿, 刘露, 张然. 枯草芽孢杆菌基因修饰生产核黄素[J]. 微生物学通报, 2017, 44(1): 59-67.
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枯草芽孢杆菌基因修饰生产核黄素
以枯草芽孢杆菌TD-234m的染色体为模板，分别PCR扩增ribA基因编码序列，cdd基因的串联启动子及前导区，sacB基因上游同源臂、下游同源臂、正向选择标记盒和内部同源片段。最后采用重叠PCR方法拼接出UPcddADCRG片段。将UPcddADCRG片段转化枯草芽孢杆菌LXZ-1感受态细胞，通过枯草芽孢杆菌内部同源片段重组，使其失去抗性标记基因。
参考文献：张续, 班睿, 刘露, 张然. 枯草芽孢杆菌基因修饰生产核黄素[J]. 微生物学通报, 2017, 44(1): 59-67.
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