iStop技术是CRISPR CBE技术的应用。该技术不需要对DNA进行双链切割，也不会导致菌体死亡。该技术通过CRISPR的sgRNA将酶引导到大肠杆菌基因组的特定位置，造成该靶点位置的C>T突变。从而将CAA、CGA、CAG等数个密码子突变为终止密码子，导致基因翻译的提前终止。该技术基因敲除原理为基因产物不完整导致基因功能缺失。其优点在于对基因组仅进行极小的改动，对生物体的干扰非常小。且无需重组模板，构建周期短，成本较低。
接种后第3、7天各观察一次菌落生长情况。发现菌落生长者，经抗酸染色证实后，可报告快速生长分枝杆菌阳性。此后每周观察一次，记录菌落生长及污染情况。阳性生长物经抗酸染色证实后，可报告分枝杆菌生长。培养阴性结果须在满8周后未见菌落生长者方可报告。观察时发现非分枝杆菌生长时，应报告污染。培养污染率应在2%～5%范围内。污染率过高，提示培养基灭菌不佳，标本前处理、接种等环节有误，应当分析原因，采取相应措施。
应使用经95%乙醇擦拭（或浸泡）脱脂，干燥、清洁、无油污、无划痕的新载玻片制备涂片，在玻片一端的1/3处注明实验室序号及标本序号（如使用的载玻片一端无磨砂面，必须使用玻璃刻刀注明编号；如使用的载玻片一端有磨砂面，可使用2B铅笔在磨砂面上直接书写）。一张载玻片上只能涂抹一份标本。每张载玻片只能使用一次，不得清洗后再次用于抗酸杆菌涂片检查。
结核分枝杆菌不发酵糖类。与牛分枝杆菌的区别在于结核分枝杆菌可合成烟酸和还原硝酸盐，而牛分枝杆菌则否。热触酶试验对区别结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌有重要的意义。结核分枝杆菌大多数触酶试验阳性，而热触酶试验阴性；非结核分枝杆菌则大多数两种试验均阳性。热触酶试验检查方法是将浓的细菌悬液置68℃水浴加温20分钟，然后再加H2O2，观察是否产生气泡，有气泡者为阳性。也可通过胞内触酶的半定量试验来区别有触酶活性的分枝杆菌。
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